商品詳情:
別稱 HCC-1937
種屬 人類
年齡(性別) 女性,23歲
組織來源 乳房;原發(fā)性導管癌;3級,ⅡB期
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述 HCC1937細胞1995年10月13日最初來源于原發(fā)性導管癌,用了11.5個月建株。腫瘤分類為TNMⅡB期,3級。BRCA1分析表明,HCC1937細胞是BRCA 15382C突變純合的,而來源于同一病人的類淋巴母細胞細胞株在這個突變位點上是雜合的。另兩個家庭成員也有這個突變;一個同卵雙生姐妹也患有乳腺癌。HCC1937細胞有一個后天的Tp53突變,而其野生型等位基因丟失;一個PTEN基因的后天的純合缺失,以及多個與乳腺癌發(fā)病機理相關的位點上發(fā)生的雜合突變。HCC1937細胞Her2-neu和p53表達都呈陰性。HCC1937細胞的上皮細胞特異性標志上皮細胞糖蛋2(EGP2)和細胞角蛋白19都呈陽性;雌激素受體(ER)和孕酮(PR)表達陰性。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~50-60小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
受體表達情況 estrogen receptor, negative; progesterone receptor, negative
基因表達情況 Epithelial glycoprotein 2 (EGP2); cytokeratin 19
保藏機構 ATCC; CRL-2336 DSMZ; ACC-513
![4.jpg HCC1937人乳腺癌細胞細胞系](https://img47.hbzhan.com/gxhpic_d7a0896008/2815d23a88cfbccaa7a93caa085cd4b117f51059caf4d84a4ce4c6d7dd7ea7c2b377d315bf9b937b.jpg)
商品屬性:
產品名稱 | HCC1937人乳腺癌細胞細胞系 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6512 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細胞 | 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
細胞系培養(yǎng)步驟:
細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?:
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數,然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細胞凍存?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展,為科學研究提供了大量的細胞樣本?。
?細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?:
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數,然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展,為科學研究提供了大量的細胞樣本?
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細胞接收后的處理:
1)HCC1937人乳腺癌細胞細胞系收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備MEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。